本期公开课上，小 E 就手把手教大家完成抵御细胞污染的“战前”部署，将 7 大污染频发的实验“雷区”各个击破，让污染源们无处躲藏！

  细胞实验室入口除了细胞实验室专门配置的通风系统，入口处就是“无菌净土”与外面“花花世界”的唯一联通之处，这也是我们狙击污染的第一要塞。

  身为“无菌净土”，细胞实验室的选址一般都颇有讲究，必须设置在一个僻静的角落，以免人来人往造成干扰。奢华型细胞房配有特制的通风和空调系统。对于标准细胞房，黏性门垫则必不可少。

  无论谁都能进入细胞房吗？NO！只有熟记无菌操作要点的人员才能拿到入场券。进入细胞房之前，我们还需要向所有与实验无关的随身物品一一告别。经过一番折腾后，大门终于为你打开，赶紧换上细胞房专用的白大褂和拖鞋，然后洗手，消毒，戴上手套，再消毒。

  适宜的温度和生长环境使水浴锅成为了细胞房中各种污染源的最佳“温床”。水浴锅一直都是细胞实验室污染源聚集的重灾区。因此，对其进行定期消毒是必须的。除此之外，我们还可以向水浴中加入适量的杀菌剂来抑制各种细菌、真菌的滋长。

  水浴时，我们一定要确保容器的瓶盖不与水接触。因为污染源可能会在此时通过瓶盖的缝隙顺势留在瓶口，等下一次倾倒液体的时候，整个实验就遭了殃。水浴结束后，要记得将盖子盖上。

  可能的话，可以用金属浴替代水浴。金属浴的相关设备更易清洁，使用也更加省心。

  ▲ 用恒温孵育器代替水浴锅，确保温控精确性和均一性的同时也减少了污染的概率

  通过显微镜按时进行检查细胞的汇合程度以及外观和形态是“细胞饲养员”的必修课。但频繁地与不同细胞系接触，使显微镜也成了污染的高发地。

  当我们在显微镜下观察细胞或其它培养物时，切忌敞口放置培养皿或培养瓶。这样不仅易引起溶液飞溅，有可能在观察时污染物镜，并进一步造成交叉污染。

  在显微镜下进行细胞检测，一定要快和稳。在从CO?  培养箱中取出细胞前就提前做好准备工作，可以为镜下作业节省更多时间。

  CO2培养箱不仅是细胞的摇篮，同时也是污染的蜜罐，防污染工作不容忽视。CO2培养箱是抵御细胞污染的一大重镇，连开关门的操作都须慎之又慎。培养箱的开关门除了会立即影响到箱体温度、湿度和对 pH 的调节外，也让箱外空气的或环境中的污染物有机可趁。因此，培养箱的开门时间能短则短，开门次数越少越好。选择带有玻璃内分门的培养箱能够更好的降低污染的风险，同时也能避免环境条件在开关门后有骤然改变。不同于生物安全柜，在日常使用的过程中，培养箱不能防止空气传播的污染物流入。有些培养箱采用内腔 HEPA 滤器去除箱体内的微生物，但如果滤器没有定期更换，它就会摇身一变成为污染的传染源。除了过滤器，培养箱的承液盘也容易滋生细菌，建议每周使用无菌用水（如: 无菌蒸馏水）更换，并做好定期消毒工作。此外，承液盘本身也必须清洁消毒。承液盘如果呈绿色，须用过氧化氢来清洁和冲洗。注意！ CO

  培养箱是不能直接放置在地板上的。带脚轮的底座除提供灵活的移动便利性，也保持箱体离开地面，当实验人员开关门时，使地面上的灰尘不易进入箱体内。许多培养箱箱体内有许多隐蔽的角落、焊缝、风道和风扇，这一些地方也是细菌喜欢藏匿的地方，必须格外注意。最优选择配置有高温灭菌的功能的培养箱，可对箱体进行自动消毒。一体成型无焊接缝的铜质箱体的培养箱也可以大大降低污染风险，抑制细菌的生长。

  首先，在操作培养箱时务必佩戴无菌手套。有可能的话，我们应全部使用培养瓶，以防止抓取培养皿时盖子意外散落，造成溶液飞溅。特别要注意的是，在开放的培养箱前不能交谈，以防止唾液飞溅，造成污染。

  每隔 6–8 周，我们应将培养箱完全清空，进行清理洗涤：先用肥皂水和清水清洁箱体和部件，再用 70% 酒精或无腐蚀性的消毒剂来擦拭消毒整个腔体，包括隔板、隔板架等部件。

  生物安全柜是咱们进行大部分实验操作的场地，因此，所有无菌操作的“金科玉律”在此都会变得更加重要。

  在开始实验前，我们一定要对超净台做全面消毒，简单的喷雾可解决不了什么样的问题，正确的做法是对整个机柜表明上进行擦拭。还有一件事必不可少，那就是事先打开安全柜通风系统，流通空气，直到原有的内部浊气都被排出。消毒完毕后，我们要给实验用品“分家”了。一般来说，我们大家可以将超净台分为洁净区、工作区和废弃区三大板块，以免手忙脚乱发生交叉污染。可别一时疏忽，把“脏物”放到洁净区哦！

  ▲ 如果你是右撇子，不妨试着按上图“排兵布阵”做好一系列准备后，开启实战模式。作战区域不宜选择敞口容器。无菌容器的使用应遵循即用即关的原则。具体操作时，管好你的手，不能伸到容器内部，行动要轻缓，以免动作过大阻碍空气流通。使用明火同样会导致气流紊乱，我们该尽量避免。

  怎么放置容器的瓶盖也很有讲究。如果超净台的桌面干净，可以将瓶盖扣在桌面上；反之，则须倒置瓶盖，当然，这时候就需要避免在瓶盖上方做相关操作了。选择能够侧置的瓶盖，就不必再为瓶盖放置问题纠结了。

  ▲ 能够侧置的瓶盖，解救你的选择困难症在这里，小 E 还是要提示警醒我们一条最基本的规范：移液时应避免吸头接触试管或培养瓶内部。此外，使用紫外灯时，要注意监测运行时间并及时检修。

  和显微镜一样，离心机也是交叉污染的重灾区。平日里我们应保持离心机盖关闭，拒污染于千里之外。

  如果你的细胞房恰好有一扇窗，那么你一定要注意了，因为无论什么时段，窗户都不允许打开。一旦打开，许多细菌会乘机夹杂在空气中溜入细胞房，后果不堪设想。

  阳光的刺激同样会对室内环境能够造成影响，有窗户的实验室必须紧闭窗门同时拉上窗帘，并做好请勿开启的警示标记。

  还记得刚开始步入细胞房做实验的经历吗？每次都得兜兜转转来到实验大楼的一个僻静角落，经过好一番折腾才被师兄师姐允许继续往前，一举一动都小心翼翼地犹如朝圣??

  无菌操作在于细节，更在于态度，即使现在久经沙场的你已经对细胞培养驾轻就熟了，也别因为步骤繁琐就敷衍了事，掉以轻心。

  俗话说得好，你今天在无菌操作上省下的时间，都会花在明天细胞污染重做实验上。